微生物薄膜過(guò)濾法的計(jì)數(shù)結(jié)果計(jì)算主要基于微生物限度檢測(cè)儀的濾膜上截留的微生物菌落數(shù)，結(jié)合過(guò)濾體積和稀釋倍數(shù)進(jìn)行推算，核心公式為：
CFU/mL=濾膜上菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)/過(guò)濾體積（mL）

具體計(jì)算步驟與注意事項(xiàng)如下：

一、計(jì)算步驟

1. 菌落計(jì)數(shù)

• 培養(yǎng)結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)濾膜上的菌落數(shù)。

• 關(guān)鍵要求：選擇菌落數(shù)在30-300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，以確保結(jié)果準(zhǔn)確性。若菌落數(shù)過(guò)多（如超過(guò)200個(gè)），需重新稀釋樣品并過(guò)濾。

2. 確定稀釋倍數(shù)

• 若樣品在過(guò)濾前進(jìn)行了稀釋（如將10mL樣品加入90mL無(wú)菌水中，稀釋倍數(shù)為10倍），需記錄稀釋倍數(shù)。

• 若未稀釋，稀釋倍數(shù)為1。

3. 計(jì)算微生物濃度(示例)

• 過(guò)濾體積：100mL

• 稀釋倍數(shù)：10倍

• 濾膜上菌落數(shù)：124個(gè)

• 計(jì)算：
  $CFU/mL=\frac{124\times 10}{100}=12.4\text{CFU/mL}$

• 若需計(jì)算每升樣品中的微生物數(shù)量，則乘以1000：
  $12.4\times 1000=12400\text{CFU/L}$

• 將菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，再除以過(guò)濾體積（mL），得到每毫升樣品中的微生物數(shù)量（CFU/mL）。

二、特殊情況處理

1. 菌落蔓延生長(zhǎng)

• 若菌落蔓延成片，無(wú)法區(qū)分單個(gè)菌落，則該平板不宜計(jì)數(shù)，需重新實(shí)驗(yàn)。

2. 稀釋級(jí)平行性要求

• 若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不少于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上，否則需重新實(shí)驗(yàn)。

3. 延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間

• 霉菌、酵母菌培養(yǎng)時(shí)間可延長(zhǎng)至5-7天，以充分生長(zhǎng)并計(jì)數(shù)。

三、結(jié)果報(bào)告

1. 報(bào)告內(nèi)容

• 檢測(cè)方法（如薄膜過(guò)濾法）、樣品信息、培養(yǎng)條件（溫度、時(shí)間）、菌落數(shù)及結(jié)論（是否符合微生物限度標(biāo)準(zhǔn)）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比

• 根據(jù)藥典或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（如中國(guó)藥典、美國(guó)藥典），判斷樣品是否合格。

• 示例：若標(biāo)準(zhǔn)要求每毫升樣品中微生物數(shù)量不超過(guò)100CFU，則上述計(jì)算結(jié)果（12.4 CFU/mL）符合標(biāo)準(zhǔn)。

四、操作要點(diǎn)

1. 無(wú)菌操作

• 確保過(guò)濾、培養(yǎng)等環(huán)節(jié)無(wú)菌，避免污染。

2. 濾膜選擇

• 根據(jù)微生物大小選擇合適孔徑的濾膜（如0.45μm）。

3. 沖洗濾膜

• 使用無(wú)菌緩沖液沖洗濾膜，去除殘留雜質(zhì)和微生物抑制劑。

4. 培養(yǎng)基選擇

• 根據(jù)微生物類型選擇適宜的培養(yǎng)基（如營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）。